Una vez que una muestra de tejido ha sido procesada por un laboratorio de histología, y transferida a un portaobjetos de vidrio, es necesario teñirla adecuadamente para su evaluación microscópica. Esto se debe a que el tejido sin teñir carece de contraste: todos los materiales fijados tienen un índice de refracción y un color similares. Si se observa una sección de tejido sin teñir bajo el microscopio, todo aparecería de un color gris apagado y uniforme.
El proceso de tinción, por tanto, hace uso de varios colorantes que tiñen componentes celulares concretos dentro de los tejidos, para que se puedan distinguir las diferentes partes celulares entre sí.
Haematoxilina y eosina
Para el examen de rutina, la hematoxilina y eosina (H&E) es la tinción de elección. Esta tinción produce colores diferentes en las estructuras tisulares, que de otro modo serían transparentes, de modo que se puede obtener una visión detallada del tejido.
Como su nombre indica, la tinción de H&E hace uso de una combinación de dos colorantes: la hematoxilina y la eosina. Ambas tinciones fueron introducidas de forma independiente en 1865 y 1875, respectivamente, por Böhmer y Fischer. En 1876, Wissowzky describió su uso en combinación como método de tinción de tejidos para teñir distintos materiales de diferentes colores.
A pesar de su simplicidad, esta tinción ha resistido la prueba del tiempo. Incluso ahora, más de un siglo después, el H&E sigue siendo la tinción de tejidos más utilizada en todo el mundo.
La ciencia detrás del H&E
La tinción no produce el color al azar; en su lugar, los colorantes explotan las diferencias en la química del tejido para colorear diferencialmente varios componentes.
La unión iónica es el tipo de unión más importante que ocurre en las técnicas de tinción histológica. Implica la atracción electrostática entre iones de carga opuesta, uno de los cuales está fijado en el tejido y el segundo en el colorante.
La hematoxilina por sí sola no es técnicamente un colorante y no tiñe directamente los tejidos. Por lo tanto, debe utilizarse en combinación con un «mordiente», un compuesto que le ayuda a unirse al tejido. El mordiente utilizado suele ser un catión metálico, como el aluminio. La hematoxilina en complejo con sales de aluminio es catiónica y actúa como un colorante básico. Está cargada positivamente y puede reaccionar con los componentes celulares basófilos cargados negativamente, como los ácidos nucleicos del núcleo. Estos se tiñen de azul como resultado.
La eosina es aniónica y actúa como un colorante ácido. Está cargada negativamente y puede reaccionar con componentes acidófilos cargados positivamente en el tejido, como los grupos aminos en las proteínas del citoplasma. Estos se tiñen de rosa como resultado.
H&E es una tinción útil para todo tipo de usos que también es rápida y fácil de usar, lo que puede explicar por qué ha resistido la prueba del tiempo. ¿Cuáles son sus consejos para la tinción de secciones de tejido?