Células epiteliais amnióticas
Amnião humana consiste em células epiteliais amnióticas (CEA) sobre uma membrana colagénica de porão, uma camada compacta acelular cheia de fibras reticulares, uma camada fibroblástica com células/histiócitos Hofbauer, e uma camada esponjosa altamente higroscópica com fibrilhas entre o córion e o saco amniótico .
AECs podem ser obtidas com digestão enzimática diferencial a partir da membrana amniónica depois de separada do córion subjacente . O âmnio contém células epiteliais que expressam marcadores de superfície que incluem tanto marcadores específicos do embrião como os antigénios específicos do estádio (SSEAs) 3 e 5, Tra-1-60, Tra-1-81, e marcadores mesenquimais CD105, CD90, CD73, CD44, CD29, antigénio leucocitário humano (HLA)-A, -B, -C, CD13, CD10, CD166, e CD117. As suas propriedades imunológicas não foram completamente elucidadas; contudo, os AEC também parecem ser resistentes à rejeição após allotransplantação, provavelmente devido às suas propriedades imunossupressoras (CD59 e HLA-G ), o que também poderia levar ao seu papel terapêutico num modelo de doença. Por exemplo, foi relatado que os HAECs têm diminuído os níveis de glucose no sangue de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina várias semanas após a implantação, potencialmente por diferenciação em células β .
hAECs são consideradas células multipotentes devido à sua capacidade de se diferenciarem em linhagens diferentes. Em particular, têm sido capazes de amadurecer sob condições de cultura específicas em células neuronais que sintetizam acetilcolina, norepinefrina, e dopamina . In vivo, os HAECs têm sido relatados como neuroprotectores e neuroregenerativos, provavelmente em relação à secreção do factor de crescimento. De facto, os estudos mostraram que os meios condicionados por hAEC apresentam efeitos neurotróficos nas células corticais de ratos, e devido à expressão de marcadores neurais como o nestin, a proteína glial fibrilária ácida, e a proteína associada ao microtubo 2, estão inclinados para linhagens neuronais. hAECs também têm sido usados para tratar lesões nervosas periféricas em modelos animais, nos quais demonstraram aumentar o crescimento dos neurónios hospedeiros e orientar a germinação regenerativa . Para além do seu potencial neurogénico, tem sido feito algum trabalho relevante na exploração do potencial hepático dos AEC. Primeiro, os AEC produzem albumina e α-fetoproteína, e mostram o armazenamento de glicogénio e o potencial de diferenciação hepática in vitro . Além disso, in vitro, as CEA tinham a capacidade de metabolizar amónia, testosterona e caproato de 17α-hidroxiprogesterona, enquanto exprimiam marcadores hepatócitos tais como albumina, A1AT, CYP2A4, 3A7, 1A2, 2B6, ASGPR1, e citocromos fetais induzíveis. Após o transplante intra-hepático em ratos imunodeficientes (imunodeficientes graves combinados)/como ratos beges, as CEH demonstraram características hepáticas funcionais, e após pré-tratamento de ratos SCID/ beges com retrorsina, as CEH expressaram genes hepáticos maduros, proteínas plasmáticas, e enzimas hepáticas a um nível igual ao do tecido hepático adulto. as CEH demonstraram eficácia terapêutica após transplante num modelo de cirrose em rato. O transplante de células epiteliais derivadas de amniões humanas para o fígado parece ter propriedades terapêuticas desejadas, incluindo a secreção de metaloproteinase matricial que instiga a fibrinólise e o aumento da concentração de interleucina-10. Num modelo de rato com doença hepática, o transplante de células epiteliais de amniões resultou num enxerto hepático com diminuição da inflamação, fibrose e apoptose hepatócica. Zhang et al. infundiram células derivadas de amniões num tetracloreto de carbono – tratado de fígado de rato, e mostraram uma fibrose e apoptose mínimas . Ricci et al. usaram um pedaço de membrana amniótica humana (hAM) para avaliar a fibrose no fígado de rato e demonstraram propriedades antifibróticas aumentadas do hAM com uma redução na reacção ductular e deposição de matriz extracelular (ECM) . Vaghjiani et al. mostraram que a diferenciação dos HAEC em células semelhantes a hepáticas pode permanecer viável e funcional após encapsulação em microesferas de alginato de bário in vitro, e podem exprimir CYP3A4, que se pensa poder decompor quase 50% de todas as drogas terapêuticas .
Além disso, a membrana amniótica criopreservada e os seus subprodutos foram reconhecidos como ferramentas significativas para o tratamento de ulceração e defeitos epiteliais (córnea ou conjuntival) . Nakamura et al. utilizaram células epiteliais autólogas séricas da córnea numa membrana amniótica para transplantar nove olhos de nove pacientes com deficiência total de células estaminais do limbo, e demonstraram uma melhoria na acuidade visual e epitelização completa da córnea no prazo de 2-5 dias . Wang et al. fizeram experiências com proteínas alogénicas fluorescentes verdes (GFP)+ ratos com enxertos de epitélio amniótico intacto com células AE syngénicas (EGFP-C57BL/6 a C57BL/6 W/t) e alogénicas (EGFP-C57BL/6 a BALB/c W/t) que foram transplantadas para a córnea ou conjuntiva ou inseridas nas câmaras anteriores. Os investigadores mostraram que os antigénios beta do complexo de histocompatibilidade principal (MHC) classe I foram minimamente expressos após a implantação. Finalmente, outras potenciais aplicações clínicas foram exploradas e os AEC foram considerados potencialmente úteis para uma ampla variedade de condições, incluindo doenças oftálmicas, fibrose pulmonar, fibrose hepática, esclerose múltipla, doenças metabólicas congénitas, tais como deficiência de transcarbamilase de ornitina, hipercolesterolemia familiar, lesões da medula espinal, e doença de Parkinson e para transplantes alogénicos de células .